Preiswerter neuer Injektor: Einrichtung des PV850-Systems

[by Gabe Gonzalez]

Der PV850 Injektor wurde entwickelt, um die intrazelluläre Injektion und verschiedene andere Mikroinjektionsaufgaben zu vereinfachen. Der PV850 verwendet regulierten Luftdruck, um Zellen mit Flüssigkeit zu injizieren. Die injizierten Volumina reichen von Pikoliter bis Nanoliter. Der Anschluss liefert positiven Druck für eine Hochdruckausstoßung mit maximal 87 PSI. Der PV850 Mikroinjektor bietet getrennt regulierte Kompensations- (Verhinderung von Rückfüllung) und Ausstoßungsdrücke mit einer präzisen Zeitschaltung, die automatisch vom Injektionsdruck auf Kompensationsdruck umschaltet. Zeitintervalle, Injektionsdruck und Kompensationsdruck werden unabhängig über die intuitive Touchscreen-Benutzeroberfläche eingestellt. Die Zeitintervalle können je nach Injektionsdruckeinstellung von 2 Sekunden bis zu 10 ms oder weniger reichen. Das Injektionsdruckintervall wird durch einen Fußschalter, manuell oder durch einen computerkontrollierten TTL-Impuls ausgelöst. Der PV850 ist dafür ausgelegt, sehr kleine Flüssigkeitsmengen zu injizieren, wie z. B. Medikamente in Zellen oder kleine Organellen. Die Druckinjektion ist eine besonders nützliche Alternative zur Elektroionophorese, da sie nicht die Verwendung geladener Ionen erfordert.

Eigenschaften

• Regulierter Kompensations- und Injektionsdruck
• Druckausgang: 0,3-87 PSI
• Die Injektion kann manuell über den Touchscreen, per Fußschalter oder durch einen computerkontrollierten TTL-Impuls ausgelöst werden
• Schlauchbaugruppe für geringe Volumina 

Vorteile

	Intuitive Benutzeroberfläche für den Injektor
	Kompakte Bauweise nimmt sehr wenig Platz auf der Arbeitsfläche ein
	Einfach zu bedienen mit Touchscreen und Steuerknopf
	Injektion in einzelne Zellen in Pikoliter-Volumen

Einrichtung des PV850 Injektors (Hardware-Setup)

Das System umfasst folgende Komponenten:

• (1) PV850 Injektor
• (1) Fußschalter
• (1) 300753 PV850 Kapillarkit 
  • (4) 1,0 mm Pipettendichtungen (grün)
  • (4) 1,2 mm Pipettendichtungen (schwarz)
  • (4) 1,5 mm Pipettendichtungen (rot)
  • (4) 1,65 mm Pipettendichtungen (weiß)
  • (2) Dichtungs-O-Ringe
  • (1) Pipettengriff
  • (1) Pipettenhalter 
  • (1) Schlauchbaugruppe zur Verbindung mit Ihrer Druckquelle
  • (1) Adapter-Schlauchbaugruppe zur Verbindung des Kapillarkits mit dem PV850
• (1) 3316 Eingangskit für PicoPumps
  • (1) 0,25" NPT-Anschluss für Stickstofftankregler
  • (1) 10' Hartschlauch
  • (1) Vakuumanschluss
• (1) CBL102 6’ BNC-Kabel 
• (1) 803130 Stereo-Splitterkabel zur Verbindung mit einem Computer für TTL-Steuerung
• (1) AC/DC 24 V Netzadapter und Kabel

Das Erste, was wir zur Einrichtung des Systems tun müssen, ist die physischen Verbindungen herzustellen:

1. Schließen Sie das Netzteil an die Rückseite des Geräts an und stecken Sie es in eine Steckdose.
2. Stecken Sie den Fußschalter-Stecker in den Fußschalter-Anschluss auf der Rückseite des Controllers. Das Kabel des Fußschalter-Steckers ist mit „Back Panel“ beschriftet.
   HINWEIS: Stecken Sie das Kapillarkit noch nicht ein.
3. Schalten Sie den PV850 ein. Beim Einschalten erscheint der Startbildschirm, und der PV850 führt einen Selbsttest durch. Nach Abschluss des Selbsttests können wir die verschiedenen erforderlichen Komponenten anschließen.
4. Die erste Verbindung ist der Eingang von Ihrer externen Druckquelle. Ein 1/4"-Hartschlauch, der im Lieferumfang enthalten ist, kann passend zugeschnitten werden. Er dient zum Anschluss Ihrer Druckquelle, eines Tanks oder einer Druckpumpe. Um den Hartschlauch zu installieren, stecken Sie ihn fest in die Schnellanschlüsse auf der Rückseite des Geräts. Wenn der Schlauch weit genug eingesteckt ist, rastet er ein und kann nicht herausgezogen werden.
   Um den Schlauch zu entfernen, drücken Sie auf den umliegenden Kragen und ziehen Sie den Schlauch heraus.
5. Verbinden Sie als Nächstes das Kapillarhalter-Schlauchset.
   • Schieben Sie das freie Ende des Adapter-Schlauchsets durch den Pipettengriff.
     Verbinden Sie ihn mit dem Stachel des Pipettenhalterkörpers.
     HINWEIS: Achten Sie darauf, dass der Stachel beim Anbringen oder Entfernen des Schlauchs nicht bricht.
   • Schieben Sie den Pipettengriff über den Stachel und schrauben Sie ihn vorsichtig auf den Körper des Pipettenhalters.
     HINWEIS: Achten Sie darauf, das Gewinde nicht zu beschädigen.
   • Legen Sie eine Dichtung der richtigen Größe in den Deckel ein.
     

     Dichtungsfarbe	Grün	Schwarz	Rot	Weiß
     Pipetten-Außendurchmesser	1,0 mm	1,2 mm	1,5 mm	1,65 mm

   • Das andere Ende des kleinen Schlauchs hat einen Schnellverbinder. Verbinden Sie ihn mit dem mitgelieferten blauen PV850-Schlauchset. 
6. Überprüfen Sie, ob der Injektionsanschluss deaktiviert ist. Falls nicht, tippen Sie auf den Bereich Einstellungen des Displays, um das Einstellungsmenü zu öffnen, und tippen Sie auf die Schaltfläche Anschluss EIN, um sie auf Anschluss AUS zu setzen.
7. Richten Sie den Easy Connect Injector-Stecker auf den Injektoranschluss an der Vorderseite des PV850 aus, schieben Sie den Stecker sicher in den Anschluss und befestigen Sie ihn mit einer leichten Drehung im Uhrzeigersinn.
8. Wenn Sie einen Computer oder Impulsgenerator verwenden möchten, um einen TTL-Impuls zur Auslösung einer Injektion zu senden:
   • Schließen Sie den Y-Stereo-Splitter (803130) an den Fußschalteranschluss auf der Rückseite des PV850 an.
   • Verbinden Sie den CBL102-Stecker mit einem der Buchsen am Y-Stereo-Splitter.
   • Stecken Sie das BNC-Kabel in den entsprechenden TTL-Anschluss Ihres Impulsgenerators.
     
     
9. Führen Sie das stumpfe Ende der Mikropipette (gezogenes Kapillarglas) durch die Dichtung in den Deckel und in den Körper ein. Schrauben Sie den Deckel fest. Der Schraubdeckel und die Gummidichtung halten die Glas-Mikropipette sicher. 

Nachdem alle physischen Verbindungen hergestellt sind, können Sie nun die Injektionseinstellungen über die intuitive Touchscreen-Oberfläche konfigurieren. Im nächsten Video zeigen wir Ihnen wie Sie die Softwareoberfläche nutzen, um Ihre Injektionsprotokolle für die Mikroinjektionen einzurichten. Weitere TECHNIKEN DER MIKROINJEKTION finden Sie im Handbuch.

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